关于菌株

1、问：斜面低温保藏法

 答：将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上,在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子,随后密封试管置于4摄氏度左右保存,具体保存温度按照保存菌种设定.保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等.此法适用范围广(细菌、霉菌、放线菌、酵母均适用),操作简便,成本低廉,复苏方便,人员能随时对微生物的状态进行观察.缺点是保藏时间较短,需要经常传代处理,因连续传代而容易引入基因突变或者杂菌,培养基的理化性质及微生物代谢产物等原因还会导致微生物性状发生改变.因此斜面低温保藏法适于短期保存常用菌株,而且应该与其他能够长期保存菌株的方法相结合防止种系丢失.

2.问：液体石蜡保藏法

答：此法是斜面低温保藏法的一种改进,只需将无菌干燥的液体石蜡注入上述培养好的斜面至高于斜面顶端1厘米处,再将试管密封,直立于4摄氏度左右冷藏保存,具体保存温度随菌种而变.注意要定期添加石蜡保证斜面处于液面以下.保藏时间至少可以达到1年(无芽孢细菌、酵母),甚至更长 。液体石蜡保藏法基本上克服了斜面低温保藏法保存时间短的缺点,然而液体石蜡保藏法由于要试管直立保存,因此比较耗费空间,不便于携带。此法要注意以下两点:①石蜡要保证无水,干热160摄氏度,2h灭菌后的石蜡可直接使用,若是用高压湿热121摄氏度,20分钟灭菌法灭菌,则要置于烘箱中至水分蒸发,石蜡液体变澄清后再使用；②用接种环取种复苏时,注意接种环要充分冷却防止液体石蜡飞溅伤人.

3.问：半固体穿刺保藏法

答：配制半固体培养基,高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3,待培养基凝固,用接种环从平面培养基上挑取单菌落,穿入培养基若干次.在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长,之后密封试管,根据菌种特点在4摄氏度左右或者凉爽干燥处保存.保存时间至少可以达到1年,对于有些菌种甚至能达到20年之久.