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微生物培养基使用注意事项(二)

更新时间:2025-08-01点击次数:143

问12:培养基PH值为什么不在标准范围内?
答12:其实出现这个情况的问题有很多种,大致分为这么6大点:
A、质量不好(生产厂家出厂时PH就不正确)
B、灭菌问题(高压灭菌温度过高或灭菌时间过长,导致葡萄糖类焦化从而PH降低)
C、保存时间(超过保质期或结块)
D、水质出现问题(可以用去离子水、纯化水、蒸馏水不能用矿泉水、自来水)
E、保存温度(保存温度过高)
F、光线直射 以上6点都可能导致培养基PH出现偏差,如果出现此类问题,建议逐一排查,直到问题解决

问13:培养基高压灭菌时为什么会焦化?
答13:不少检验人员在实验时,发现经过灭菌的培养基有焦化现象,我认为引起此现象的主要原因有以下4点:可能你灭菌的时候温度超过了121℃,灭菌时间过长培养基在容器中装的太多(不要超过容器容量的80%)灭完菌的培养基在高温环境中保存的时间过长,这些都会导致培养基发生焦化现象。

问14:培养基PH怎么测定?
答14:通常分两种情况:
对于无需高压灭菌的培养基,先煮沸溶解后再冷却至25℃时,测定其PH值(固体培养基至少测2个点,取其平均值)
对于需要高压灭菌的培养基,高压灭菌后,冷却至25℃测其PH(固体培养基至少测2个点,取其平均值)

问15:含琼脂培养基在倒平板为什么有时候不凝固或凝固不好?
答15:针对以上情况,我做了分析:针对需要高压灭菌的培养基,倒平板时候要先摇匀(因为琼脂分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底部,导致琼脂分散不均匀)针对无需高压灭菌的培养基,一次煮沸溶解后不能直接倒平板,应重复煮沸溶解3-5次(因为一次不能确保琼脂充分溶解)。

问16:为什么同一产品的不同批号,粉末颜色有差别?
答16:分析可能有3个原因:此培养基成分含有染料或指示剂不同批次粉末培养基含水量不同,一般要求≤6%,含水量越高,颜色越深。加工时间越长,颜色越深。

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