测定原理:
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇,释放的CoA还原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,测定412 nm吸光度增加速率可计算AAT活性。
使用酰基转移酶(AAT)测定试剂盒时的注意事项有:
1.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
2.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
3.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
4.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
6.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
7.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。