维生素E检测试剂盒的操作步骤:
样本处理:
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.2g,加入1mL提取液) 加入提取液,充分匀浆后用提取液定2mL,在漩涡混匀仪上震荡5min,于25℃, 5000g离心10min, 取上层测定。
2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议1000万细胞加 入2mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);在漩 涡混匀仪上震荡5min,于25℃,5000g离心10min,取上层测定。
3. 血清:取0.2mL,加1.9mL提取液,漩涡仪混匀上震荡5min,于25℃,5000g离心10min,取上层 测定。
测定操作:
对照管 测定管 样品(μL) 500 500 试剂一(μL) 100 100 试剂二(μL) 100 试剂三(μL) 100 充分混匀,25℃反应 5min 试剂四(μL) 300 300 充分混匀,于 1mL 玻璃比色皿,无水乙醇调零,测定 530nm 处吸光值,记 为 A 对照管和 A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。
维生素E检测试剂盒在实验过程中,能更有效的保持试剂稳定,并且容易保存,其操作方法简单,结果判定比同类产品更客观更具优势。如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。