胰蛋白酶选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,是一种重要的消 化酶。 胰蛋白酶催化水解 BAEE 的酯键，生成 BA，BA 在 253nm 处有吸收峰，通过测定 253nm 吸光度增加速率，即可计算出胰蛋白酶的活性。
胰蛋白酶测定试剂盒的测定步骤：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到555 nm，蒸馏水调零。
2. 工作液的配制：临用前根据用量按照试剂一(V)：试剂二(V)：蒸馏水(V)：试剂三(V)=1 mL：1 mL：5.4 mL：0.4 mL的比例充分混合。(注意：现用现配，用多少配多少，在空瓶中配制，试剂盒中带有4个空瓶)
3. 吸取25μL样本，加入975 μL工作液，混匀后立即测定，记录555nm下1min时的吸光值A1和2min时的吸光值A2。计算△A=A1-A2
注 意：
1、如果△A小于0.005，可将反应时间延长到5min。如果△A大于0.5，体系迅速变色，可将样本用提取液稀释后测定(建议稀释10倍)，计算公式中乘以相应稀释倍数。
2、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
3、实验时要使底物避光保存。
