丙酮酸测定试剂盒的测定步骤：

1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。

2、取300μL 样本+100μL 试剂一于1.5mL EP 管中，混匀，静置2min，加入500μL 试剂二，混匀，于520nm波长处测定管吸光值A。

丙酮酸的计算方法：

1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0466x + 0.0675； x 为丙酮酸含量（µg/mL），y 为吸光值。

2、按照血清（浆）体积计算

丙酮酸含量（μg/mL）= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷（V3×V1÷V2）=214.6×(A-0.0675)

3、按照蛋白浓度计算

丙酮酸含量（μg/mg prot）=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr

4、按照样品质量计算

丙酮酸含量（µg/g 鲜重）= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2）=21.46×(A-0.0675) ÷W

5、按照细菌或细胞密度计算

丙酮酸含量（μg/104 cell）＝[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷（500×V1÷V2）=0.043×(A-0.0675)

V1：加入反应体系中样本体积，0.3mL；V2：加入提取液体积，1 mL；V3：加入血清（浆）体积，0.1 mL；

Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。