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SolarRed核酸染料的方法介绍

更新时间:2022-07-29点击次数:1885

SolarRed核酸染料2种使用方法:
1.胶染法
(1) 制胶时加入SolarRed核酸染料(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL SolarRed 10,000× 储液,以此比例类推)
(2) 按照常规方法进行电泳。
注意事项:
(1) 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做10050mL的胶。
(2) 由于SolarRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将SolarRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。SolarRed兼容几乎所有常用的电泳缓冲溶液。
(3) 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
(4) 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常规方法进行电泳。
(2) H2OSolarRed 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成染色液。(例如将15μL SolarRed 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O)
(3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.510%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。

注意事项:
(1) 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
(2) 3×SolarRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直用完。

在使用核酸染料时建议合理的佩戴手套、口罩、护目镜等护具,并在符合要求的环境下进行造作,避免核酸染料对操作者的皮肤和呼吸系统造成影响。不小心接触皮肤后应该立刻清洗,并妥善处理废弃物。

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