回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定, 样品水中含有无机氯 20 mg/L, 取 100mL 被测水样品, 加入 0.1mL 浓度为 10mg/mL 的含无机氯标准样品, 测定时忽略体积变化, 如果测定出样品中无机氯为 2.98mg/L, 则认为回收率为 98%。对于定量检测来说,主要还是一个准确度的验证。
相对回收率可能会高于满百的,如果只是说“损失程度”,其实是不准确的。应该说,回收率越接近满百,说明这个试剂盒的准确度越高。
elisa试剂盒步骤如下:
1.首先用包被缓冲液将已知抗原稀释到1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.第二日日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
5.37℃孵育30-60分钟,洗涤; 最后一遍用DDW洗涤。
6.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
7.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
8.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
操作以上步骤完毕后,就可以知道结果了。