elisa试剂盒出现误差的情况不在少数,那具体是什么会导致elisa试剂盒实验出现误差呢?接下来大家一起来探讨了解一下。
一、肉眼调查稍显色,酶标仪打印为阴性的标本在实践工作中是难以避免的,肉眼目测成果不可靠,应以酶标仪判读为准。
二、不同的elisa试剂盒厂家,产品其生产工艺和操作方法会略有不同,必须依照所用试剂盒严格操作,不然容易发生检测成果的不确定性。
三、加样时样品量差错,关于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值邻近的标本影响极大,主张校正加样器。
四、由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。
五、临界值邻近标本动摇为正常现象,任何elisa试剂盒均不可避免。能够考虑将标本做奇数次复检。
elisa实验的八个细节:
1. 在收到试剂盒后,为保证检测效果,需要根据说明书中保存条件正确储存。除非特别注明,试剂盒大多是在2~8°C条件下储存。
2. 在实验进行前,请确认包装中的试剂盒成分与说明书一致,再进行后续操作。
3. 溶解标准品过程中,注意标准品是否受潮,过程中要避免产生泡沫。
4. 为了避免交叉污染,配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。
5. 每次孵育时,正确使用封板胶纸可保证结果的准确性。
6. 正确洗板有助于实验结果的稳定性。
7. TMB显色底物在上板前应为无色,请避光保存。加入孔板后,将由无色变成不同程度的蓝色。
8. 终止液上板顺序需与底物上板顺序一致,加入终止液,溶液颜色由蓝色变为黄色。如果出现绿色,即表明终止液与底物未混匀,请充分混合。