在ELISA试剂盒实验中，用直接法测定抗体，不能直接用酶符号测定抗体，然后直接加入底物。而要加酶标抗抗体呢?
如果将酶符号应用于待测抗体，直接法比经典法更复杂，在探索符号条件时，不能保证抗体因误操作而失活;酶标二抗目前已较为常见，被规模化生产，购买后使用方便。如果你直接做好了，方法已经优化了，d一抗二抗显色，总时间加起来，结果不会超过2到3小时。
可以使用直接ELISA法，即抗体包板用来在抗原上标记酶，然后显色，这与直接方法相比，减少了一步的时间，缩短了时间。然而，直接法和直接法各有优缺点，其要求取决于实验的具体要求。
1、要检测的抗体通常是免疫后产生的抗体。其中有免疫功能衰竭、抗体过少等因素存在。酶符号的使用存在许多不确定因素，如在使用酶符号之前无法测量效价的可能性，这会导致不必要的混淆。
2、酶联免疫吸附试验(ELISA)中酶联抗体与抗体结合后，ELISA试剂盒具有很强的信号放大作用，可使信号扩增一千倍以上，适用于低抗体含量的测定。
3、直接酶标记抗体在筛选出单克隆抗体后可以考虑，但测定系统的建立需要大量的工作。
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