双抗体夹心法是将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里，洗涤一次；加待测抗原，如两者是特异的，则发生结合，然后把多余抗体洗除；加入与待测抗原呈特异反应的酶联抗体，使形成“夹心”；加入该酶的底物，若看到有色的酶解产物产生，说明在孔壁上存在相应的抗原。 酶联免疫吸附试验( ELISA )原理是一种将抗原抗体反应的特异性和酶促反应的高效催化作用结合起来的方法。基本原理:先将抗体或抗原包被到固相载体表面，然后与待测样品中的抗原或抗体发生反应，再加入酶标抗体与载体表面的抗原抗体复合物结合，后加入酶底物系统进行显色，根据颜色深浅或光密度(OD)值的大小进行定性或定量分析，从而得出待测标本中抗原或抗体的含量。常用方法有双抗体夹心法常用于测抗原间接法常用于测抗体本试验以双抗体夹心法原理检测AFP，以协助原发性肝癌的早期诊断。
索莱宝Human IL-6 elisa试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。试剂盒的检测原理如下：
1.将抗人 IL-6 单克 隆抗体包被在酶标板上；2.分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的人 IL-6 会与酶标 板上的包被抗体充分结合；3.洗板后加入生物素化抗人 IL-6 抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品 和样本中的人 IL-6 发生特异性结合；4.洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链 霉亲和素会发生高强度的非共价结合；5.洗板后加入显色剂底物 TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的人 IL-6， 则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；后，在 λmax=450 nm（OD=450 nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的人 IL-6 浓度与 OD 成正比，通过 绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中人 IL-6 的浓度。
