土壤淀粉酶的分离芽孢杆菌实验
淀粉酶(amylase,AMY或AMS)全称是1,4-α-D-葡聚糖水解酶,催化淀粉及糖原水解,生成葡萄糖、麦芽糖及含有α1,6-糖苷键支链的糊精。一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷键的酶。淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称,通常通过淀粉酶催化水解织物上的淀粉浆料,由于淀粉酶的性及专一性,酶退浆的退浆率高,退浆快,污染少,产品比酸法、碱法更柔软,且不损伤纤维。淀粉酶的种类很多,根据织物不同,设备组合不同,工艺流程也不同,目前所用的退浆方法有浸渍法、堆置法、卷染法、连续洗等,由于淀粉酶退浆机械作用小,水的用量少,可以在低温条件下达到退浆效果,具有鲜明的环保特色。
该实验是:取样以后分散在无菌水中,在一百度左右加热十分钟杀菌,由于芽孢杆菌产芽孢,不会死,其他的细菌死亡,将样品梯度稀释,
配制组合培养基,培养基中不含有葡萄糖等单糖碳源,只含有大分子的淀粉,再加上一些无机盐,并且加入醋酸t(thallium acetate)磺胺脒,等抑制革兰氏阴性菌生长的试剂,灭菌,倒平板。(培养基的成分要适合芽孢杆菌的生长,起富集作用)
然后用梯度稀释后的样品涂布,选择有单菌落生长的培养基,在显微镜下镜检,如果符合芽孢杆菌的形态标准,则认为已经分离到了,挑取单菌落,保留菌种。