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渥曼青霉素试剂应用案例
渥曼青霉素试剂应用案例
  应用实例(仅作参考):
  为检测wortmannin对PI3激酶和PLK1的抑制作用,先用不同浓度的wortmannin(0.25-50nM)预处理可溶的Jurkat片段10min,然后用AX7503(50nM)处理60min,发现wortmannin抑制PI3激酶和PLK1的IC50值分别为5.8nM和2.1nM。为检测wortmannin在体内对PLK1的抑制作用,先用10μM nocodazole(抗肿瘤药)处理Jurkat细胞15h(G2/M期阻滞),再用不同浓度的wortmannin(5,25,100,500nM)处理完整细胞30min(对照组用DMSO),发现PI3激酶和PLK1的活性都有降低,但是wortmannin对PI3激酶的抑制作用更。
  为检测wortmannin对胰岛素代谢活性的作用,1μM wortmannin与不同浓度的胰岛素(0-100nM) 和1nM胰岛素与不同浓度的wortmannin(0-1μM)分别孵育大鼠脂肪细胞20min,胰岛素即使在高浓度(0.1μM)时其活性也可以被wortmannin抵消,而0.03μM wortmannin就可以抑制胰岛素水平,在0.1μM时可以*抑制胰岛素。为检测wortmannin对脂肪细胞中PI 3激酶活性的抑制作用,用不同浓度的wortmannin(0,1,10,100,1000nM) 进行处理,0.1μM wortmannin 可以*抑制PI-3激酶活性,wortmannin具有选择性,在相同浓度时不会抑制PI-4激酶。
  渥曼青霉素试剂是一种,不可逆的PI3K特异性抑制剂(IC50=2-5 nM),分离自丝状真菌Penicillium funiculosum,抑制活性高于另外一种常用的PI3K抑制剂LY294002。

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