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ELISA试剂盒实验中血清标本宜在新鲜时检查
2020-11-06
ELISA试剂盒实验中可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作标本以测定其间某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如大便和某些分泌物)。血浆中除尚富含纤维蛋白原和抗凝剂外,别的成份均对等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只需待血清天然凝集、缩短后即可取得。除特殊情况外,在医学查验中均以血清作为检查标本。在ELISA中血浆和血清可对等运用。血清标本可按惯例方法收集,应留...
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谈谈细胞凋亡的效应机制
2020-10-28
今天来了解一下细胞凋亡的效应机制吧凋亡细胞的特征性表现,包括DNA裂解为200bp左右的片段,染色质浓缩,细胞膜活化,细胞皱缩,后形成由细胞膜包裹的凋亡小体,然后,这些凋亡小体被其他细胞所吞噬,这一过程大约经历30-60分钟,Caspase引起上述细胞凋亡相关变化的全过程尚不*清楚,但至少包括以下三种机制:1凋亡抑制物正常活细胞因为核酸酶处于无活性状态,而不出现DNA断裂,这是由于核酸酶和抑制物结合在一起,如果抑制物被破坏,核酸酶即可激活,引起DNA片段化。现知caspase...
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ELISA试剂盒的基本原理有这三条,你知道吗?
2020-10-26
ELISA试剂盒因此含杂质较多的抗原也可选用捕获包被法,试验的特异性、敏感性均由此得以改善,重复性亦佳。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附联络的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的效果于。可将聚苯乙烯板先经紫外线照射(例如30W紫外灯,75cm照射12小时),以增加其吸附功能。例如,在检查抗DNA抗体时,需用DNA作为包被抗原,ELISA试剂盒而广泛的固相载体一般不能直接与核酸联络。换言之,包被就是抗原或抗体联络到固相载体表面的进程。当抗原决定簇...
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ELISA试剂盒洗涤的两大方法
2020-10-14
洗涤虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELISA靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。重点分析:ELISA试剂盒洗涤的两大方法一、浸泡式1.吸干或甩干孔内反应液;2.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);3.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;4.吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液...
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ELISA试剂盒在试验过程中需要注意什么
2020-10-12
ELISA试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的试验确诊方法。尽管ELISA试剂盒的操作过程看似简单,但没做到位的话就会影响试验的作用。所以在试验过程中这几点非常重要:1、重要的洗刷:不充分的洗刷会导致差异和高布景,从而带来不抱负的试验结果。假如未结合的材料残留在微孔板中,那么它会添加布景噪音。有必要的话,可添加洗刷液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反响。假如布景过高,置疑洗刷不行时,能够测验添加洗刷次数。2、关键的关闭:关闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位...
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ELISA试剂盒的选购指南
2020-09-27
目前市场上的ELISA试剂盒质量参差不齐,如何去挑选适合自己的试剂盒就显得特别重要,具体有以下几点可供参考:一、特异性:ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分,抗体对有关,若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。二、灵敏度:灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的量的能力,用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒,如果待检指标量很低,一般的试剂盒不能满足要求,可选择高敏的ELISA试剂盒。三、重复性:科学实验讲求重复性,一般ELISA试剂盒,其板内和板间...
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你知道缓冲液的原理吗?
2020-09-25
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HOAc与NaOAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H+离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。在缓冲溶液...
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胰蛋白酶消化液对细胞的分离效果与哪些因素有关
2020-09-23
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)和传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液.胰蛋白酶消化液一共有三种,分为胰蛋白酶-EDTA消化液(不含酚红);胰蛋白酶-EDTA消化液(含酚红);胰蛋白酶消化液(不含酚红),可根据客户的需要来选择.其中,胰蛋白酶含量为0.25%(2.5g/L),EDTA含量为0.02%(0.2g/L).PBS为常用的不含钙镁的细胞培养用PBS.经无菌过滤,可直接使用.胰蛋白酶消化液对细胞的分...