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  • 常用细胞固定液及优缺点比较

    2025-09-01 细胞固定液作用是杀死细胞,固定细胞形态。下面列举几种常用细胞固定液及优缺点比较。1.冷丙酮可用于一般的免疫组化染色。将纯的丙酮预先放入冰箱-20℃后便为冷丙酮(放心,丙酮在此温度不会为固体的)细胞爬片取出后,PBS洗2遍,便可加入冷丙酮于-20℃(丙酮有很强的挥发性,注意将含有丙酮和爬片的器皿盖严,防止其挥发)固定10分钟。取出后,室温吹干,然后放入-20℃保存。2.多聚甲醛(常用4%):可用于免疫电镜;也可用于免疫荧光以及TUNEL染色。主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别...
  • cck8实验步骤及注意事项

    2025-09-01 CellCountingKit-8简称CCK-8试剂盒,为MTT法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。下面介绍一下索莱宝cck8实验步骤及注意事项。一.制作标准曲线(测定细胞具体数量)1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培...
  • 细胞爬片的制备

    2025-08-28 细胞爬片又名爬片。细胞爬片就是让玻片浸在细胞培养基内,细胞在玻片上生长,主要用于组织学,冰冻切片,细胞涂片,免疫组织化学,原位杂交等。下面给大家简单介绍细胞爬片的制备。1.爬片可用一般的盖玻片,也可用专用爬片;2.应用盖玻片,可根据自己的需要剪裁成合适的大小,以备置于6孔板、12孔板或24孔板;裁剪时可用前护士输液用于打开玻璃安瓶的小沙轮,或者是口腔科的那种小沙轮,轻轻划一下后,稍用力一掰就分开了。如果接种大皿的话,我一般不将盖玻片切开,直接清洁后放入培养皿中,到染色时再将之...
  • 细胞复苏的操作步骤及注意事项

    2025-08-28 平时研究用的细胞,有需要冷冻保存。冷冻的过程称为冻存,把冻上的细胞化开的过程叫细胞复苏。细胞复苏是一简单的试验操作,但操作中有许多需要注意的事项,在实验操作中注意细小问题,才能使复苏后的细胞状态保持良好。细胞复苏实验准备:主要器材:一次性滴管、打火机、酒精灯、大镊子、中镊子、记号笔、废液缸、封口膜、剪子。主要试剂:PBS、培养液、消化酶(胰酶)、75%酒精、双抗。PBS配制:NaCL:4gKCL:0.1gNa2HPO4:1.745gKH2PO4:0.1g三蒸水:500mL,溶...
  • 细胞冻存与复苏操作步骤与注意事项文档

    2025-08-28 细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。...
  • 关于CCK8实验步骤的叙述

    2025-08-28 CCK-8为细胞增殖检测试剂盒,细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。必须强调指出,通过细胞分裂,可以将复制的遗传物质,平均地分配到两个子细胞中去。可见,细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。CCK8实验步骤如下。CCK-8实验步骤1、在96孔板中配置100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5%CO2)。2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。4、向...
  • MTT法检测细胞活性步骤及原理

    2025-08-26 要知道MTT法检测细胞活性步骤首先要知道MTT是什么?MTTMTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT法检测细胞活性原理检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无...
  • MTT实验步骤有哪些,有什么注意事项

    2025-08-26 MTT通常用于药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定以及.细胞增殖及细胞活性测定。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。但是由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水,需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加,也会对实验结果的准确性产生影响,而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。在MTT实验步骤中要注意的是MTT有致癌性,用的时候小心,有条件最好带那种透明的薄...
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