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DAB染色液的使用方法及注意事项
2025-10-16 DAB染色液用于免疫组化染色，应用在Dako自动染色系统上。DAB染色液的使用方法1.DAB显色液配制10mMTris-HCl(pH7.6)9mL+DAB(diaminobezidin3，3-二氨基联苯胺)+0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,显色时加入5-10mL30%H2O2混匀后立即使用2.显色准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗（或生物素）处理、辣根过氧化酶（HRP）标记的二抗（或链霉亲和素）处理、清洗等步骤。3.加入适量的DAB显色液，...
病理染色——各种组织切片方法如何选择
2025-10-16 组织学被定义为对细胞和组织的微观结构（显微解剖学）的科学研究，其重要组成就是组织的制片和染色观察。随着显微镜技术和免疫实验等的发展，组织制片切片技术也得到了广泛的应用，自常用的石蜡切片、冰冻切片中演化出了碳蜡切片、塑封切片、振动切片和超薄切片等等适用于不同实验需求的制片方式。今天，小编就来带大家一起了解一下这些切片方式和它们的应用方向。石蜡切片碳蜡切片塑封切片超薄切片石蜡PEGHMMA、GMA环氧树脂3-8um3-8um0.5-2um50-80nm组织结构保存良好，能切连续薄...
干货分享—病理切片技术选择与应用指南
2025-10-16 病理切片技术全攻略：如何精准选择石蜡、冰冻、速冻、塑封切片？在科研领域，组织切片技术是揭示生命微观奥秘的核心工具。无论是基因表达定位、蛋白质互作研究，还是超微结构解析，切片质量直接影响实验数据的可靠性。然而，面对石蜡切片、冰冻切片、速冻切片、塑封切片等多种技术，科研工作者常陷入选择困境。本文从科研需求出发，解析四大切片技术的原理、适用场景及操作要点，助你轻松匹配实验目标！一、技术原理与科研场景解析▶石蜡切片：形态学研究的基石技术原理：组织经甲醛固定后，梯度脱水、透明化，石蜡包...
关于菌株
2025-10-13 1、问：斜面低温保藏法答：将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上,在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子,随后密封试管置于4摄氏度左右保存,具体保存温度按照保存菌种设定.保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等.此法适用范围广(细菌、霉菌、放线菌、酵母均适用),操作简便,成本低廉,复苏方便,人员能随时对微生物的状态进行观察.缺点是保藏时间较短,需要经常传代处理,因连续传代而容易引入基因突变或者杂菌,培养基的理化性质及微生物代谢产物等原因还会导致微生物性状发生改变.因此斜...
关于PCR，你知道多少？（四） ----几种特殊的PCR
2025-10-13 1、锚定PCR（anchoredPCR）通常采用的PCR反应必须知道欲扩增的DNA或RNA片段两侧的序列，而在大多数情况下对某些序列本身或其旁侧序列并不清楚，“锚定PCR”可以帮助克服序列未知或序列未知带来的障碍。基本做法是：分离细胞总RNA或者mRNA，在反转录酶的作用下合成cDNA，通过DNA末端转移酶在cDNA3’末端加上poly（dG）尾巴。与此poly（dG）相对应的锚定引物poly（dC）为保证扩增特异性，建议此段旁聚（dC）在十二聚以上，5’端可带上某些限制酶序...
关于PCR，你知道多少？（三）----Taq DNA聚合酶
2025-10-13 ----TaqDNA聚合酶在PCR反应中，毫无疑问的DNA聚合酶是最关键的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段。但该酶存在很多缺陷，使之不能广为应用，比如：热稳定性差，每次DNA热变性后大部分酶都被灭活，需要重新加入，每个循环都要重新加入；Klenow酶反应温度较低，引物和模板容易形成非特异性配对，产生非特异性扩增。后来人们曾使用过T4DNA聚合酶和T7DNA聚合酶，两者虽使扩增特异性增加，且使DNA合成速度提高了，但是由于其对热的稳定...
关于PCR，你知道多少？（二）
2025-10-13 ----PCR反应引物设计PCR反应中引物起着很重要的作用。模板的不同、欲扩增的片段不同、需要的片段长度不同或者是用途不同等等，对引物的要求是不一样的。PCR作为一种体外酶促反应，其效率和特异性主要取决于两个方面，一是引物和模板结合的特异性，二是多聚酶对引物的有效延伸。引物设计的总原则就是提高扩增的效率和特异性。引物设计的原则一般遵循下列几项：1、引物的长度以15～30bp为宜。引物过短会使特异性降低，过长则成本增加，而且也会降低特异性。常用的是18-27bp，但不应大于38...
关于PCR，你知道多少？（一）
2025-10-13 PCR的原理多聚酶链式反应（polymerasechainreaction）简称PCR技术，是近30多年发展起来的一种体外扩增特异性DNA片段的技术，可在数小时之内对仅有几个拷贝的基因放大千万倍。那么，PCR的原理是怎样的呢？PCR技术实际上是在模板DNA、引物以及原料（四种脱氧核糖核苷酸）在适宜的反应条件下，通过DNA聚合酶的酶促反应完成DNA扩增的过程。PCR技术的特异性取决于引物和模板DNA结合的特异性。PCR反应分为三步：1）变性：通过加热时DNA双螺旋的氢键断裂，双...

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