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细胞培养 中出现黑点是污染吗?如何处理?
2025-08-05
一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸;(2)血清质量不好，反复冻融的结果;(3)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;(4)配制培养基的水质、容器不合格。可应...
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胎牛血清使用中的常见问题（二）
2025-08-05
4、培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗?一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。5、为什么要热灭活血清?加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES细胞、平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。6、有必要做热灭活吗?实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生...
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如何避免胎牛血清中产生沉淀?
2025-08-05
按如下操作可避免沉淀的产生：(1)解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。(2)血清分装冻存时，须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4)勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏，从而影响血清的品质。(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。(6)若必须做血清的热灭活，请遵...
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胎牛血清使用中的常见问题（一）
2025-08-05
1、如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，推荐在-20℃以下储存血清，并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。2、血清中包含絮状...
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Caspase-3 活性检测原理
2025-08-04
Caspase-3是凋亡过程中最主要的终末剪切酶，因而也是研究最多的caspase，它激活pro-caspase-2,6,7,9等，特异水解多种凋亡关键蛋白如PARP，介导细胞核染色质固缩、凋亡小体生成、核DNA断裂。试剂盒测定原理基于Caspase-3特异水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Aspp-nitroanilide(Ac-DEVD-pNA)，释放硝基苯胺pNA。游离硝基苯胺pNA呈黄色在405nm具有最大吸收峰，用普通可见光分光光度比色方法测定。根据...
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微生物培养基使用注意事项（二）
2025-08-01
问12:培养基PH值为什么不在标准范围内？答12:其实出现这个情况的问题有很多种,大致分为这么6大点:A、质量不好(生产厂家出厂时PH就不正确)B、灭菌问题(高压灭菌温度过高或灭菌时间过长,导致葡萄糖类焦化从而PH降低)C、保存时间(超过保质期或结块)D、水质出现问题(可以用去离子水、纯化水、蒸馏水不能用矿泉水、自来水)E、保存温度(保存温度过高)F、光线直射以上6点都可能导致培养基PH出现偏差,如果出现此类问题,建议逐一排查,直到问题解决问13:培养基高压灭菌时为什么会焦化...
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微生物培养基使用注意事项（一）
2025-08-01
问01:微生物培养基是否有说明书？答01:微生物培养基一般是没有说明书的，培养基中组分和使用说明都在瓶子的标签上。问02:微生物培养基的货号是什么？答02:微生物培养的货号大部分都是以LA开头的。问03:微生物培养基是否可以定制？答03:微生物培养基的制作工艺流程比较复杂，所有目前还定制不了客户所需要的培养基。问04:培养基pH的初步调正。答04:因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，培养基各成分充分溶解后，应进行pH的初步调正。例如，牛肉浸液约可降低pH=0.2，而肠浸...
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科研人紧急集合！靶蛋白捉迷藏游戏，该结束了！
2025-08-01
还在为传统pulldown技术的非特异性结合抓狂？实验数据总被干扰，关键靶蛋白玩“失踪”？Don'tworry！救星来了~索莱宝小分子Pull-down试剂盒携黑科技登场，直接开启科研“开挂”模式！什么操作？一图看懂技术魔法！1.备好生物素化诱饵分子：小分子化合物、多肽、蛋白、DNA、RNA统统可以；2.混入样本和反应体系，摇身一变！原本“松松垮垮”的诱饵与靶蛋白结合，直接升级成链霉亲和素与靶蛋白的“共价铁CP”，最后用生物素琼脂糖一抓一个准；3.质谱鉴定直接“破案”靶蛋白身...
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