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细胞爬片的制备
2025-08-28
细胞爬片又名爬片。细胞爬片就是让玻片浸在细胞培养基内，细胞在玻片上生长，主要用于组织学，冰冻切片，细胞涂片，免疫组织化学，原位杂交等。下面给大家简单介绍细胞爬片的制备。1.爬片可用一般的盖玻片，也可用专用爬片；2.应用盖玻片，可根据自己的需要剪裁成合适的大小，以备置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪时可用前护士输液用于打开玻璃安瓶的小沙轮，或者是口腔科的那种小沙轮，轻轻划一下后，稍用力一掰就分开了。如果接种大皿的话，我一般不将盖玻片切开，直接清洁后放入培养皿中，到染色时再将之...
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细胞复苏的操作步骤及注意事项
2025-08-28
平时研究用的细胞，有需要冷冻保存。冷冻的过程称为冻存，把冻上的细胞化开的过程叫细胞复苏。细胞复苏是一简单的试验操作，但操作中有许多需要注意的事项，在实验操作中注意细小问题，才能使复苏后的细胞状态保持良好。细胞复苏实验准备：主要器材：一次性滴管、打火机、酒精灯、大镊子、中镊子、记号笔、废液缸、封口膜、剪子。主要试剂：PBS、培养液、消化酶（胰酶）、75%酒精、双抗。PBS配制：NaCL:4gKCL:0.1gNa2HPO4:1.745gKH2PO4:0.1g三蒸水：500mL，溶...
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细胞冻存与复苏操作步骤与注意事项文档
2025-08-28
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。...
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关于CCK8实验步骤的叙述
2025-08-28
CCK-8为细胞增殖检测试剂盒，细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。必须强调指出，通过细胞分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去。可见，细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。CCK8实验步骤如下。CCK-8实验步骤1、在96孔板中配置100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（37℃，5%CO2）。2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。4、向...
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MTT法检测细胞活性步骤及原理
2025-08-26
要知道MTT法检测细胞活性步骤首先要知道MTT是什么？MTTMTT是一种粉末状化学试剂，全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT法检测细胞活性原理检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无...
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MTT实验步骤有哪些，有什么注意事项
2025-08-26
MTT通常用于药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定以及.细胞增殖及细胞活性测定。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。但是由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。在MTT实验步骤中要注意的是MTT有致癌性，用的时候小心,有条件最好带那种透明的薄...
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简述细胞培养的步骤
2025-08-26
细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术，而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系，特别是在医药领域的发展，细胞培养更具有特殊的作用和价值。以下来具体讲一下细胞培养的步骤。细胞培养的步骤一、细胞复苏：1.将新鲜培养基置于37℃水浴锅中回温，回温后喷以75%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。如配置：50mL完-全培养基(含10%FBS，1%青链霉素双抗)44.5mL基础培养基+...
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动物外周血淋巴细胞分离液的注意事项
2025-08-26
使用的注意事项：1.开封前颠倒混匀，本分离液为无菌产品，为延长分离液保存时间，请在无菌条件下启封，避免微生物污染。。2.分离液使用时应始终保持室温（18℃~25℃），如室内温度较低，可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条件下离心，可能会导致白膜层中红细胞污染加重。3.血液样本最好为新鲜抗凝血（采血2h以内），为保持淋巴细胞的活性，应避免冷冻和冷藏。4.稀释血液或洗涤细胞，不可使用含Ca、Mg离子的缓冲液及培养液，其成分会导致血细胞凝集，大大降低细胞得率及纯度。5.部分塑料制品...
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