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几种感受态细胞的用途、基因型和特点
2025-09-02
1、DH5菌株用途:克隆菌，用于分子克隆、质粒提取。基因型:supE44△lacU169（?80lacZ△M15）hsdR17recAlendAlgyrA19thi-1relAl特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘性平板的抑制型菌株.其?80lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。recAl和endAl的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒的提取。2、TOP-10菌株用途：克隆菌，用于分子克隆，质粒提取。基因型：F_m...
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核酸电泳之聚丙烯酰氨凝胶电泳
2025-09-02
核酸电泳，想必大家耳熟能详的就是琼脂糖凝胶电泳了。今天我们要来讲讲另外一个跑核酸的方法--聚丙烯酰氨凝胶电泳。对于聚丙烯酰氨凝胶电泳，想必大家第一反应是蛋白质的电泳，再就是伯乐的电泳设备了。是的，蛋白电泳和伯乐电泳设备都是我们熟悉的。来看看DNA的聚丙烯酰氨凝胶电泳吧。看看胶的配置有什么不同呢？20%的变性聚丙烯酰胺凝胶8ml；尿素3.36g，加入45%丙烯酰胺溶液3.56ml，5XTBE1.6ml，加热是尿素溶解,加水至8ml，将两者混匀后冷却至室温。再加入3-6ul的TE...
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提取DNA的方法总结与比较
2025-09-02
dna提取是一项经常要做的实验，下面我们就总结了四种dna提取方法并做详细说明和比较。一.浓盐法提取dna：A.利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M氯纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA钠盐沉淀出来.B.也可用0.15MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯...
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索莱宝试剂盒提取植物dna步骤
2025-09-01
试剂盒提取植物dna已经获得广泛应用。各个生化试剂厂家也都有了dna提取试剂盒产品。索莱宝作为国内生化试剂供应商提供了各类dna提取试剂盒。今天给大家介绍试剂盒提取植物dna步骤。当然是以索莱宝产植物基因组dna提取试剂盒产品为例。使用前先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、植物组织预处理：取新鲜植物组织（不超过100mg）或干重组织（不超过20mg），于液氮中充分研磨至细粉状，让液氮自然挥发。2、将研磨好的植物...
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RNAwait(非冻型组织RNA保存液)的作用
2025-09-01
RNAwait是一种无毒的可直接使用的样品储存液，能使细胞内的RNA与RNA酶分离，可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。组织获取后立即浸入RNAwait保存液中，在室温可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃标本可以长期保存，RNA稳定存在不降解，取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。操作流程：1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1mlRNAwait）。2.将RNA...
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索莱宝：细胞爬片制备详细过程
2025-09-01
【爬片的准备】1.爬片可用一般的盖玻片，也可用专用爬片；2.应用盖玻片，可根据自己的需要剪裁成合适的大小，以备置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪时可用前护士输液用于打开玻璃安瓶的小沙轮，或者是口腔科的那种小沙轮，轻轻划一下后，稍用力一掰就分开了。如果接种大皿的话，我一般不将盖玻片切开，直接清洁后放入培养皿中，到染色时再将之切开，这样既保证了细胞均一性，又可同时做几个指标的染色。3.将剪裁好的爬片，置于浓硫酸中浸泡并过夜，第二天先用自来水冲洗20遍，再置于无水酒清中浸泡6小时...
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常用细胞固定液及优缺点比较
2025-09-01
细胞固定液作用是杀死细胞，固定细胞形态。下面列举几种常用细胞固定液及优缺点比较。1.冷丙酮可用于一般的免疫组化染色。将纯的丙酮预先放入冰箱-20℃后便为冷丙酮（放心，丙酮在此温度不会为固体的）细胞爬片取出后，PBS洗2遍，便可加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很强的挥发性，注意将含有丙酮和爬片的器皿盖严，防止其挥发）固定10分钟。取出后，室温吹干，然后放入-20℃保存。2.多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫电镜；也可用于免疫荧光以及TUNEL染色。主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别...
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cck8实验步骤及注意事项
2025-09-01
CellCountingKit-8简称CCK-8试剂盒，为MTT法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。下面介绍一下索莱宝cck8实验步骤及注意事项。一.制作标准曲线（测定细胞具体数量）1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞到培...
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